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[分享] HIV 的检测方法有哪些?

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发表于 2024-9-27 18:27 | 显示全部楼层
最近根据很多恐艾咨询者描述,自己网购了试纸自测,但是不知道是因为自己储存不当,还是说本身试纸的质量有问题,自测几次结果有时候会出现差异,更有甚者同时测试好几张,结果竟然会有差异,尤其是出现了弱阳结果,瞬间心理破防,陷入无限的恐惧中无法自拔,即使后边去医院检测一直是阴性,依然无法从恐艾中走出,严重影响日常生活。
针对此类提问现在就讲我们医院内的检测方法和流程与大家做一个分享,因为很多东西都是说明书上摘抄的,仅供参考,如有雷同纯属巧合。
首先实验室检测一般分为初筛实验和确诊实验,很多地方医院由于实验室级别和资质问题,有时候只做初筛实验,最后的确诊实验都是去当地疾控部门做,现在我们就浅谈一下几种实验的的原理以及优劣性。



(一)筛选试验
快速检测(乳胶法、胶体金、胶体硒)
特点:无需仪器,操作简单。可以从正规药店,机构,网店购买。
结果判读:一条杠为阴,两条杠为阳。



  • 酶联免疫法(ELISA法既可以检测抗原,也可以检测抗体)
原理:抗原抗体特异性结合,再加底物显色。用仪器测吸光度值。
操作流程示意图



优点:免疫学检测技术具有检测速度快、费用低廉、灵敏度高和选择性强等优点。它将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合,可以机器判读,便于自动化和一次性检测大量标本。
缺点:1.检测抗原时,与免疫荧光法相比,敏感度有待提高,一般只能检测可溶性病毒抗原。
          2.操作过程有些繁琐,反应需要时间,不能一蹴而就。


  • 化学发光法
原理:抗原抗体特异性结合,再加荧光标记的底物,测发光值。

优点:1.化学发光采用吖啶酯作为发光底物,它具有灵敏度高,干扰因素少、发光强度大、光子产率不受抗原抗体结合干扰、标记物稳定等诸多特点,此技术的应用极大程度的缩短了病人的检测窗口期,对于灰区附近的弱阳性标本,漏检率低
2.线性量程范围宽,对传染病患者能做到早发现,早诊断,早治疗,早干预。
缺点:成本太高,多为进口仪器,试剂和仪器较贵
确证实验的检测方法
在2020年之前,确证实验是以检测抗体的免疫印迹法为金标准。在2020年之后,增加了核酸检测,两者都可以作为阳性判定的标准。

  • 免疫印迹法
原理:利用特定抗体能够专一结合其抗原蛋白质的原理来对样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息,来分析检测特定蛋白质的生物学检测技术。应用到HIV的检测上,就是将HIV的不同蛋白(抗原)分离开,转移到膜上。血清中抗体和这些抗原结合,加底物显色。
优点:细分抗体,更加谨慎,阳性判定的最终标准。

  • 核酸检测
原理:核酸检测
原理:HIV的核酸检测也就是HIVRNA的检测,通过PCR扩增,直接检测病毒本身。
特点:这个检测的窗口期时间更短,一般人感染了艾滋病病毒过7到10天左右在血液里面就会检测到艾滋病病毒,也就是检测到艾滋病的核酸。在两周左右血液里面的艾滋病的核酸就会达到一个高峰的状态。所以如果进行艾滋病的核酸检测结果是阳性的,那就一定可以确诊是艾滋病的感染。
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发表于 2024-9-27 18:29 | 显示全部楼层
检测艾滋,对目前国内从基层到大医院开展的项目来说,总的来说分为三大类:
一、抗体检测
二、抗原抗体检测
三、核酸检测



来源:ws-293-2019

从ws-293-2019对窗口期的定义中我们可以看见,目前HIV主要检测物为:抗体、抗原、核酸。
一、抗体检测

抗体检测分个HIV抗体筛查实验和HIV确证实验。
1.HIV抗体筛查实验
检测方法有酶联免疫吸附实验、化学发光或免疫荧光实验、免疫层析实验、免疫凝集实验、免疫渗滤实验。
其中医院以及疾控实验室里面最常用的有:酶联免疫吸附实验、化学发光实验。
各大基层卫生院和自己购入的自测试纸(快检试纸)其实就是所谓的免疫层析实验。
2.HIV确证实验
确证实验是在获得筛查实验结果后,为了准确判断,继续检测血液有无HIV抗体。
确证实验包括:免疫印迹实验、重组/线性免疫印迹实验,免疫层析实验、免疫渗滤实验。我国各大确证实验室常用的是免疫印迹实验。
二、抗原抗体检测

抗原抗体检测也是属于筛查实验,因为比抗体检测多加了一个P24抗原的检测,因此窗口期较抗体初筛实验提前了1周左右。
抗原抗体检测方法有:酶联免疫吸附实验、化学发光或免疫荧光实验、免疫层析实验、免疫凝集实验、免疫渗滤实验。
其中医院以及疾控实验室里面最常用的有:酶联免疫吸附实验、化学发光实验。
目前我国流通的抗原抗体检测的自测试纸(快检试纸)为进口的雅培。
三、核酸检测

核酸检测目前常用作HIV的补充实验,在以下情况中最容易用到。
1、当用四代试剂(抗原抗体联合检测试剂)测出来为有反应,且用抗体试剂双孔/双份或两种抗体试剂复检后均无反应的样品,考虑此时可能处在HIV感染的急性期,抗原测出来而抗体没测出来,首选HIV-1核酸检测。
2、当筛查实验为有反应而确证实验为不确定时,如果病人有想早点知道结果的诉求,可以推荐做HIV-1核酸检测。



来源:全国艾滋病检测技术规范(2020年修订版)

核酸检测分为:RNA检测和DNA检测。
目前常用的是RNA检测,也就是常说的病毒载量检测。虽然没有正式文件推荐核酸检测作为HIV的初筛实验,这个并不代表HIV核酸检测的灵敏度、准确度不如抗体或者抗原抗体检测的好,主要原因在于核酸检测价格较抗体和抗原抗体检测昂贵且开展的医院少,没有普及推广。
如果在没有服用阻断药的情况下,想早点知道自己是否感染艾滋且能找到做核酸检测的医院情况下,肯定是做核酸检测最快最直观。
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