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质谱是一种与光谱并列的谱学方法,质谱分析测量离子核质比。与X射线NMR红外谱吸收谱等相比是唯一可测分子量的方法。也可测蛋白四级结构。精确度很高,能区分分子量相近不同基团如氧气和甲烷。使离子、分子带电方法不同但很重要。质谱可与其他分离仪器连用,如质谱-液相色谱。质谱是带电粒子在磁场中分开测质量的技术。质谱不属波谱范围;质谱图与电磁波波长和分子内某种物理量改变无关;质谱是分子离子及碎片离子质量与其相对强度的谱;谱图和分子结构有关;进样量少,灵敏度高,分析速度快。
系统:进样系统-(真空系统,大量氧会烧坏离子源灯丝,用作加速离子的几千伏高压会引起放电,引起额外离子-分子反应,改变裂解model,谱图复杂化)-离子源-加速区-质量分析器-检测器。
质量分析器:FTICR,time of flight,ion traps, quadrupole,。。
质谱图:横坐标为离子的质核比,纵坐标为离子相对强度或相对丰度。
质谱根据离子化方法分类:基质辅助激光解析电离(MALDI,激光照样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光吸收能量传给生物大分子,电离生物分子将质子转到生物分子或从生物分子得到质子.TOF原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,质核比与其飞行时间成正比。作图时浓度为纵坐标质核比为横坐标。用胰蛋白酶处理时主切Lys和Arg,Arg最灵敏)、电喷雾电离(ESI, 使大质量有机分子离子化,有小分子带电残基机制和大电子离子蒸发机制。分子量和蛋白四级结构都可测)、电子轰击离子源(EI,用高速电子束冲击样品,瞬间产生多种离子,结构不稳定不易得到分子量 )、化学电离(CI,首先使反应气甲烷电离,被电离气离子和分析分子发生分子-离子反应,分子离子化,得到结构和分子量)、场解析电离(FD,强电场使样品一个价电子被强电场正极夺取,结构不稳定可用)、快原子轰击(FAB,类似CI,样品溶于极性基质通过已被轰击惰性气体使样品离子化)。 |
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