荧光定量pcr检测供应商哪家好？

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　　市面上的荧光定量pcr检测供应商多种多样，对于一些不了解的供应商一定要慎重选用，我们实验室是需要经常进行pcr采购的，固定的供应商是上海莼试生物技术有限公司，他们专门经营生科研化试剂、分析试剂的，追求品质，服务客户，努力将欧美专业生产厂家所供应的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视自主产品的研究和开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务，有需要的可以多多了解一下：
　　miRNA荧光定量PCR检测试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测，包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。（该试剂盒须与miRNA对应cDNA链合成试剂盒（ALH189）配套使用。）
　　miRNA荧光定量PCR检测试剂盒步骤：
　　1.匀浆处理:
　　a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
　　b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导至提取的RNA有DNA污染。
　　c.细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。产品仅用于科研
　　2.将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
　　3.可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。
　　4.离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
　　5.每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
　　6.2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
　　7.把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
　　8.2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。