COMET™ 是一款自动化染色/成像设备，它整合了一个用于放置染色缓冲液、市售无标记一抗和荧光标记二抗的试剂台。试剂通过一个可容纳最多4张玻片的圆形玻片板进行加样，玻片随后在显微镜控制的软件下自动成像。通过在 COMET™ 上编目和验证大量抗体，制定中枢神经系统自发荧光管理策略，并优化标准操作程序，我们实现了亚细胞水平的可视化。一个样本最多可使用40种分析物进行分析，这在仅能通过活检对中枢神经系统进行取样的情况下具有临床实用性。 COMET™是一种全自动染色/成像一体化平台，其核心在于 “顺序染色、成像、洗脱”循环： 无需修饰抗体：使用市售未标记一抗与荧光二抗，降低门槛与成本。 微流控芯片：每次循环检测两种蛋白，成像后通过温和洗脱彻底去除抗体，避免信号交叉。 自动化成像与配准：系统自动生成多层OME-TIFF图像，所有通道对齐精准，支持后续深度分析。 支持多种样本：除常规石蜡切片外，也可用于新鲜冰冻样本。
该系统单次可分析多达40种标志物，尤其适合脑活检等组织量有限的临床样本。
研究团队针对中枢神经系统建立了200余种标志物的验证库，涵盖胶质瘤、阿尔茨海默病、癫痫等多种疾病。其中特别关注了小胶质细胞特异性标志物P2RY12，相比TMEM119，其在人脑组织中更具特异性。 此外，团队还开发了系统的： 抗体优化流程：通过浓度梯度测试确定最佳信号强度 背景荧光校正策略：利用系统自带的荧光淬灭与图像减影功能，有效去除脑组织自发荧光干扰 标志物排列建议：根据抗原稳定性决定其在染色循环中的顺序
研究通过对胶质母细胞瘤组织进行20轮循环染色，验证了系统在以下方面的表现： 组织完整性保持：>95%细胞保留，无明显组织流失 核形态稳定：DAPI信号在多轮洗脱后仍保持清晰 信号一致性：多数标志物在不同循环间信号稳定（Pearson相关系数≥0.8） 操作者间可重复性高：不同操作者间阳性细胞百分比差异仅为1–3%
相较于IBEX、CycIF等学术系统或Bruker Canopy等商业化方案，COMET™具有以下优势： 全自动化：减少人工操作，提升通量与一致性 无光漂白损伤：避免传统方法中的组织热损伤 “边缘效应”低：微流控芯片保持恒定压力，适合活检等小样本分析 灵活定制面板：支持根据研究问题快速调整标志物组合
该研究不仅提供了一套针对神经系统的标准化操作流程与分析工具（如Visipharm®软件整合），也为肿瘤免疫微环境、神经炎症、脑肿瘤异质性等研究提供了强有力的技术平台。 未来，该系统有望与空间转录组、单细胞测序、人工智能分析等多组学技术结合，推动神经科学迈向更精准、更立体的“空间生物学”时代。 Najem H, Pacheco S, Turunen J, Tripathi S, Steffens A, McCortney K, Walshon J, Chandler J, Stupp R, Lesniak MS, Horbinski CM, Winkowski D, Kowal J, Burks JK, Heimberger AB. High Dimensional Proteomic Multiplex Imaging of the Central Nervous System Using the COMET™ System. bioRxiv [Preprint]. 2025 Feb 19:2025.02.14.638299. doi: 10.1101/2025.02.14.638299. PMID: 40027731; PMCID: PMC11870576. 探秘微观，引领生命科技前沿！精准偶联，开启分子操作新时代；超敏检测，赋能临床检验新应用！杭州乐为生医科技有限公司，精心打造多款科研利器：
- 寡核苷酸偶联试剂盒，实现蛋白分子超灵敏检测；也可用于蛋白蛋白偶联
- 抗体定点修饰叠氮基团试剂盒，实现抗体修饰的精确把控；
- 氨基修饰微球抗体偶联试剂盒，实现自主、简便DIY微球修饰抗体/蛋白；
- 寡核苷酸纯化试剂盒，助力高纯度、高回收率短片段寡核苷酸纯化。
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