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[分享] 什么是细胞共培养?

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发表于 2025-4-5 16:38 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2025-4-5 16:39 | 显示全部楼层
细胞培养分布不均匀怎么办?
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发表于 2025-4-5 16:40 | 显示全部楼层
细胞共培养又称为复合培养或混合培养,是指将2种或2种以上细胞放在同一培养系统中培养。与单层细胞培养技术相比,细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境,以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物的作用机制和可能的作用靶点。细胞共培养技术一直倍受关注,主要用于研究诱导干细胞分化、提高代谢物产量、提高细胞生存能力、维持细胞功能和活性、体外组织的构建等。目前,细胞共培养方法主要包括直接接触共培养、间 接接触共培养和三维细胞共培养,3 种方法的选择主要根据 共培养细胞的正常形态、研究者的目的以及研究能否方便、 顺利进行而决定。
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发表于 2025-4-5 16:41 | 显示全部楼层
什么是共培养?
共培养是指将两种或两种以上的细胞放在同一培养系统中培养,来研究细胞间的相互作用。既然要研究两种或两种以上细胞的相互作用,我们肯定是想观察它们是如何相互影响的,比如A细胞的存在就会促进或抑制B细胞的生长(即维持细胞生长);A细胞分泌的物质(如:细胞因子)会影响B细胞功能(如诱导细胞分化、增殖、分泌、成血管能力等),所以第一步我们应该要明确细胞特性(即研究其与其他细胞共培养的必要性)。
明确共培养的细胞特性
神经元原代培养需要一定的星形胶质细胞支持,采用混合培养、插入式培养皿、Banker共培养等与星形胶质细胞共培养,来研究神经元生长发育、损伤及损伤后修复;原代新生心肌细胞体外培养必须要有心脏成纤维细胞的支撑;免疫细胞与肿瘤细胞共培养,可开展肿瘤免疫相关研究。
那共培养主要有哪几种方式呢?主要可分为直接与间接共培养方式
直接共培养
A细胞与B细胞直接接触培养,如原代神经元与星形胶质细胞,原代心脏心肌细胞与成纤维细胞等。
间接共培养
间接共培养顾名思义,细胞间没有直接接触,是为了探究一种细胞对另外一种细胞的生命过程的影响,而排除由于细胞直接接触引起的影响。
1)嵌入式细胞共培养法(Transwell小室):简单理解成用一张有通透性的膜将两种细胞隔开,此膜的通透性体现在膜有孔,孔径大小0.1-12 μm不等(膜的类型及孔径可根据细胞大小与细胞是否需要通过膜孔进行选择),这样就可以实现两种细胞间接共培养,且能研究细胞分泌的物质对另一种细胞生长、代谢等途径的影响(具体的Transwell小室原理将在后面的图解中结合实例讲解)。
2)条件培养基共培养法:用培养过一种细胞的培养基培养另一种细胞,两种细胞不直接接触(此种方法在文献中也较常见,如研究分泌因子的作用)。
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发表于 2025-4-5 16:41 | 显示全部楼层
20世纪80年代后期,为了建立更类似于体内环境的培养体系,尽可能使体外环境与体内环境相吻合,从而使细胞间能相互沟通信息,相互支撑生长增殖,人们在细胞培养技术的基础上发展出了细胞共培养技术。细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以这种方法被广泛应用于现代细胞研究中。
目前,细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立:①直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触;②间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后将这两种载体置于同一培养环境之中,使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触。
共培养体系主要作用:诱导细胞向另一种细胞分化;诱导细胞自身分化;维持细胞功能和活力;调控细胞增殖;促进早期胚胎发育和提高代谢产物产量。目的是用于诱导细胞向另一种细胞分化,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调控,促进早期胚胎的发育和提高代谢产物的产量。

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发表于 2025-4-5 16:41 | 显示全部楼层
细胞共培养是指将2种或2种以上细胞(来自同一组织或不同组织)放在同一培养系统中培养。细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境,以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物作用机制和可能的作用靶点。
细胞共培养方法主要包括直接接触共培养间接接触共培养三维细胞共培养
1、直接接触共培养
在合适的条件下, 将2种或2种以上细胞按照一定比例共同培养在同一培养皿中。
适用于体内邻近的组织细胞以及2种生长状态相同的细胞,主要用于研究细胞间相互作用以及诱导细胞分化。


2、间接接触共培养
①条件培养基共培养法:用培养过一种细胞的培养基培养另一种细胞,2种细胞不直接接触,而细胞因子可以交流,其优点是可以消除目的细胞对条件细胞的影响,突出条件细胞对目的细胞的作用。
②“爬片式”共培养法:将一种细胞先接种在处理后的玻片上,待细胞贴壁后,以一定比例放入另一种细胞的培养皿中与其共培养。


③嵌入式细胞共培养法(Transwell小室):Transwell小室是一类有通透性的杯状装置, 杯子底层放一张有通透性的膜,一般常用的是聚碳酸酯膜,孔径大小有0 .1~12 .0 μm。将Transwell小室放入培养板中, 细胞A种在上室内,下层种植的细胞B培养液中的成分可以影响到上室内的A细胞,从而可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A生长、运动等的影响。



3、三维细胞共培养
选用微结构或生物降解材料创造三维共培养微环境。
4、细胞共培养体系在离体实验中的作用
①诱导细胞向另一种细胞分化;
②诱导细胞自身的分化;
③维持细胞的功能和活力;
④调控细胞增殖;
⑤促进早期胚胎的发育;
⑥提高代谢物产量。
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