Western blot，不推荐整膜带marker的理由, 真实WB/ Western blot欢迎垂询交流~ykt3728

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Western blot，不推荐整膜带marker的理由-1, 真实WB/ Western blot欢迎垂询交流~ykt3728
越来越多的SCI要求：内参和目的蛋白在同一张膜上，尽量不跑平行胶，因为操作的不一致性可能影响定量结果的准确性。因此，在泳道安排合理一致的情况下，是可以裁剪PVDF或NC膜的。原始无裁剪的gel/blots图中“裁剪”指的是在Ai或者PS作图过程中的裁剪，说白了就是让你提供每个条带作图前的原始图。反驳二：一图胜前言，就以最新的大名鼎鼎nature cell biology（双一区，IF=28.213）的文章举例，“Nuclear condensates of YAP fusion proteins alter transcription to drive ependymoma tumourigenesis”（Nat Cell Biol. 2023 Feb;25(2):323-336. doi: 10.1038/s41556-022-01069-6.）里展示的原始无裁剪的gel/blots图。










Western blot，不推荐整膜带marker的理由-2,
而整膜带marker，这时候就“可能”需要对膜stripping，然后孵育第二种甚至反复到第三种抗体，Stripping排除其他的不讲，整个流程会耗费不少的时间，从节约时间的角度来讲能不做最好；并且stripping条件过于激烈或多轮洗脱时，还会剥离已转印到膜表面的抗原使WB的最终信号削弱；此外，stripping buffer未清除干净时，其中的某些组分一定会干扰第二种抗体的结合。因此，实际操作过程中，所谓“未裁剪”的整张PVDF或NC膜，往往只孵育了一种抗体，内参和目的蛋白不在同一张膜上，这就是典型的平行胶，可信度还不及切膜孵不同抗体。反驳三：一图胜前言，就以最新的大名鼎鼎nature cell biology（双一区，IF=28.213）的文章举例，“A neurodevelopmental epigenetic programme mediated by SMARCD3-DAB1-Reelin signalling is hijacked to promote medulloblastoma metastasis”（Nat Cell Biol. 2023 Mar;25(3):493-507. doi: 10.1038/s41556-023-01093-0.）里展示的原始无裁剪的gel/blots图。








Western blot，不推荐整膜带marker的理由-3, 真实WB/ Western blot欢迎垂询交流~
因此SCI要求：原始无裁剪的gel/blots图中“裁剪”指的是在Ai或者PS作图过程中的裁剪，而非WB实操过程的“裁剪PVDF或NC膜” 反驳四：一图胜前言，就以最新的大名鼎鼎nature cell biology（双一区，IF=28.213）的文章举例，“MLL3 loss drives metastasis by promoting a hybrid epithelial-mesenchymal transition state”（Nat Cell Biol. 2023 Jan;25(1):145-158. doi: 10.1038/s41556-022-01045-0.）里展示的原始无裁剪的gel/blots图。















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