免疫荧光实验常见问题之染色较弱或没有染色

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可能的原因如下：组织本身不存在你想研究的目的蛋白或者表达量很少。

如果怀疑目的蛋白并不存在，可以通过多种方式验证，比如WB。因为不同探究蛋白的实验的原理和操作会不一样，所以可能得到的结果会不一样，多种实验的验证geng有可能避免假阴性的出现。如果目的蛋白表达量很少，则可以考虑增加一个扩大荧光信号的步骤。

荧光显微镜的问题。
如果对荧光显微镜的参数设置不对，有可能导致看不到荧光。比如光源/滤光设备与你想检测的荧光不匹配。每次拍照，记得检查参数是否有误。
曝光时间太短或吸光太少(gain值太低):可以尝试调大Gain值并/或增加曝光时间，找到*值。
曝光时间太长，出现荧光淬灭：避免让切片过度曝光。使用完立即将切片保存在黑暗处。
细胞/组织固定过度：因为过度固定可以让抗原表位带上面具，使得抗体无法与抗原结合，这样当然就没啥荧光啦。所以可以尝试减少固定的时间，也可以尝试做抗原修复以显现抗原表位。

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